SEPARASI, SPESIASI DAN FRAKSINASI 8

4 Kompleks Organik

Data Potensiometri banyak digunakan untuk mendapatkan konstanta kestabilan kompleks logam-ligan yang memungkinkan pemodelan distribusi spesies sebagai fungsi dari pH. Konstanta Stabilitas berasal dari data titrasi dengan kuadrat fitting rutin terkecil. Database IUPAC untuk konstanta stabilitas tersedia di Internet (www.acadsoft.co.uk). Set lengkap konstanta stabilitas β_λ = [MH_νL_λ]/[M][H]_ν[L]_λ memungkinkan perhitungan konsentrasi masing-masing spesies sebagai fungsi pH, asalkan konsentrasi logam total, [M], dikenal. Sistem cairan kompleks Ni(II)-glycinate telah diteliti secara mendalam dan bertindak sebagai dasar bagi perbandingan antar laboratorium yang menunjukkan standar nilai deviasi β antara tujuh laboratorium umumnya kurang dari 0,1 unit log. Kompleksasi dimulai dengan Ni(Gly) pada sekitar pH 4 dengan Ni(Gly)₂ mendominasi di atas pH 7 dan Ni(Gly)^3- Dan Ni(Gly)OH terjadi pada pH basa. Spektrum optik dari sistem ini adalah ditafsirkan dalam hal spesies ini, penguatan kepercayaan dalam pemodelan potensiometri. Spesies minor Ni(Gly)₂OH^-, Ni(Gly)₃OH^2-, dan NiOH juga ada dalam beberapa data.

Ketika spesies yang dihancurkan adalah elektroaktif di elektroda merkuri, teknik elektrokimia seperti pengupasan voltametri anodik/anodic stripping voltammetry (ASV) dan voltammetri stripping serap katodik/adsorptive cathodic stripping voltammetry (ACSV) adalah metode yang paling langsung untuk mempelajari jejak spesiasi logam pada konsentrasi sangat rendah (10^-8 – 10^-11 mol · dm^-3).

5 Senyawa organologam

Analisa Speciation untuk campuran organometallic pada umumnya dilaksanakan oleh teknik hyphenated basa pada penggabungan chromatography dengan deteksi element-selective.

Termal stabil dan spesies volatile, dan yang dapat dikonversi menjadi seperti itu, lebih mudah dipisahkan dengan kromatografi gas. Contohnya adalah analisis spesiasi senyawa organotin. Residu Lingkungan biocides butyltin dan phenyltin diekstraksi dari matriks, diderivatisasi oleh alkilasi dan ditentukan dengan, misalnya, dengan deteksi fotometri nyala GC, GC/MIP-AES, GC/MS, atau GC/ICP-MS dengan batas mutlak deteksi sampai ke tingkat femtogram. Sebuah tinjauan baru-baru ini mencakup metode yang ada untuk penentuan organotin dalam sampel lingkungan.

Spesies yang tidak bisa diterima GC maka dipisahkan dengan HPLC atau zona kapiler elektroforesis. ICP-MS sejauh ini teknik deteksi yang paling banyak digunakan. Sebuah contoh penting adalah senyawa organoarsenic; mereka termasuk arsenoacids mono- dan dimetil, senyawa kuartener seperti arsenobetaine dan arsenocholine, dan ribosides arsinoyl. Telah diusulkan sejumlah mekanisme pemisahan HPLC, pertukaran anion dan pasangan ion fasa terbalik-HPLC yang paling populer.

6 Senyawa makromolekul dan kompleks

Teknik kromatografi mendominasi analisis kompleks logam-protein. Ada berbagai luas kolom yang tersedia untuk ukuran-pengecualian, pertukaran ion, afinitas, dan kromatografi fase terbalik. Ketika menggunakan teknik ini sering diasumsikan bahwa makromolekul dan logam yang ditemukan dalam fraksi yang sama berhubungan dengan satu sama lain dalam sampel asli. Sebelum ini dapat disimpulkan, perlu untuk memastikan bahwa pemisahan logam dari bioligand belum terjadi. Sayangnya, pemisahan tersebut dapat dipengaruhi oleh buffer dan packing/pengepakan kolom, dan ini adalah aturan dari suatu  pengecualian. Ketika sampel yang kompleks seperti fraksinasi plasma darah, setiap fraksi masih akan berisi banyak potensi ligan, dan keterkaitan yang jelas logam dengan komponen tertentu yang tidak sama sekali secara langsung. Kaitan/Asosiasi ini harus didukung oleh bukti tambahan, misalnya, dari spektrometri massa atau kromatografi afinitas. Ionisasi logam kompleks dengan makromolekul untuk spektrometri massa sangat sulit, dan sejauh ini hanya untuk metallothioneins yang memiliki beberapa bukti yang telah diperoleh dengan cara ini. Jika unsur mengikat protein terikat pada putaran ke antibodi pada kolom afinitas, maka link antara logam dan protein bisa meyakinkan.

Teknik Elektroforesis seperti sodium dodecyl sulfat elektroforesis gel-Polyacrylamide (SDS-PAGE) dan elektroforesis 2-D berguna untuk memisahkan protein. Namun, untuk selenoproteins atau logam-protein kompleks rasio rendahnya satu sampai ribuan dari massa logam dengan massa protein yang artinya mungkin sulit untuk mendeteksi elemen. Radioisotop sering digunakan untuk meningkatkan batas deteksi.

Karena kompleksitas sistem, memperoleh informasi tentang kompleks logam-makromolekul melibatkan sejumlah langkah. Gambar 1 menggambarkan urutan langkah-langkah dalam fraksinasi dan spesiasi analisis kadmium dari hati kelinci. Langkah pertama (Gambar 1a) adalah fraksinasi dengan SEC-ICPMS yang memisahkan metallothionein-Cd (Cd-MT) dari fraksi spesies Cd lainnya yang potensial.

Dalam langkah kedua (Gambar 1b), HPLC anion-exchange digabungkan dengan ICP-MS lebih lanjut memisahkan fraksi Cd-MT ke MT-1 dan MT-2 isoform menurut urutan ligan. Langkah ketiga (Gambar 1c) menggabungkan unsur-unsur dari kedua fraksinasi dan analisis spesiasi; diterapkan HPLC fase-terbalik ke fraksi Cd-MT-2 anion-exchange. Hal ini menggambarkan analisis baik spesiasi, asalkan puncaknya berisi satu spesies, atau fraksinasi jika sinyal muncul dari campuran spesies. Diperlukan sebuah teknik untuk verifikasi kemurnian kromatografi. Spektrum massa (Gbr. 1d) dari salah satu puncak mengidentifikasi perwakilan campuran kompleks. Hal ini dimungkinkan untuk setiap atribut massa molekul untuk satu spesies. Tiga dari puncak sesuai dengan perbedaan kompleks MT Cd-Zn-2 dengan amino yang sama urutan asam (MT-2a). Sebagai konfirmasi, Gambar. 1e menunjukkan spektrum massa apoprotein dilucuti dari logam, menunjukkan bahwa kami memiliki kompleks Cd yang berbeda dari ligan yang sama. Puncak keempat sesuai dengan kompleks Cd-7 dari ligan dengan urutan asam amino yang berbeda (isoform MT-2c).

+++++++UNTUK MENDAPATKAN TULISAN LEBIH LENGKAP DAN/ATAU SUMBER ASLI DAPAT KONTAK KE = aungsumbono@gmail.com   +++++++++++++++++++++++++++++++++